GIBCO胎牛血清的保存應該要注意哪些要點呢?
更新時間:2020-03-27 點擊次數:831次
GIBCO胎牛血清的保存應該要注意哪些要點呢?
GIBCO胎牛血清來自牛胎兒通過屠宰場的封閉收集系統(tǒng)抽取的血液。胎牛血清是廣泛使用的用于真核細胞的體外 細胞培養(yǎng)的血清補充劑。這是因為它具有非常低水平的抗體并含有更多生長因子,從而允許在許多不同細胞培養(yǎng)應用中的多功能性。
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
GIBCO胎牛血清的作用:
1、提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
GIBCO胎牛血清經過活性炭-葡聚糖處理保存應該注意以下幾點:
?。?)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
?。?)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
?。?)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清。
?。?)血清中的沉淀物 絮狀物
?。?)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量。