ReadyAMP®PCR直接擴增技術(shù)應(yīng)用在油菜葉中的優(yōu)勢
基因工程油菜作為全球種植面積增長最快的作物廣受科學(xué)家的關(guān)注。而油菜籽擁有豐富的油脂含量,使得油菜成為一種十分重要的油料作物。常見的轉(zhuǎn)基因油菜方向包括品種改良、抗病、抗蟲、抗除草劑等,想要獲得一系列優(yōu)良品種,則需要面對大量待篩選葉片。目前實驗室提取基因組DNA的技術(shù)手段很多,例如CTAB法、離心柱提取法。但是以上方法操作步驟多、費時費力、效率極低,大大降低了實驗室研究人員的積極性。一旦遇到田邊采樣,還面臨著采樣周期,快遞回實驗室檢測等長周期檢測過程,無法做到即采即做。
從經(jīng)濟角度考慮,目前應(yīng)用于油菜葉片中提取基因組DNA的方法主要為CTAB法。該方法局限性很大,例如油菜葉取材量大、步驟多、離心步驟多、使用某些有毒有害試劑,且無法高通量操作。隨著田邊診斷的推進,加上逐年增加的油菜葉檢測量,傳統(tǒng)方法已經(jīng)不能滿足實驗室需求,我司開發(fā)的ReadyAMP®油菜葉直接PCR擴增試劑盒能夠快速、精準(zhǔn)檢測到目的基因。此方法優(yōu)點如下:
—對樣本量要求不高
—操作簡單快速
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用蛋白酶和有毒有害有機試劑
案例A 油菜葉片擴增12對基因
RL:油菜葉片 +:植物基因組試劑盒提取基因組(20×) —:陰性對照
取油菜葉3mm,直接置于ReadyAMP®油菜葉片直接PCR擴增試劑盒(貨號Nu-RAR01)中,擴增12個不同長度基因,用植物基因組提取試劑盒(貨號Col-D04)提取基因組為對照(基因組20×稀釋)。
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