NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)應用在水稻中的操作流程
水稻是我國重要的糧食作物之一。受限于人口壓力,可耕種面積減少以及自然災害等壓力,培育高產(chǎn)抗病蟲害的水稻品種是提高水稻產(chǎn)量的重要環(huán)節(jié)。隨著基因編輯技術(shù)的快速發(fā)展,分子生物學技術(shù)滲透到農(nóng)業(yè)育種的方方面面。所以轉(zhuǎn)基因指標的檢測,分子標記育種等手段都需要進行基因組DNA檢測。但是面對大量待篩選樣本,例如葉片、種子等,就目前實驗室提取基因組DNA的技術(shù)手段而言效率太低。無論是使用CTAB法還是硅膠柱提取法,光液氮研磨就占據(jù)了工作量的一般,從而使整個提取純化過程費時費力。從而大大降低了實驗室研究人員的積極性。
從經(jīng)濟角度考慮,目前應用于水稻中提取基因組DNA的方法主要為CTAB法。該方法局限性很大,例如取材量大、液氮研磨、步驟多、提取時間長、使用不易購買的有毒有害試劑,反復離心,且無法高通量操作。隨著田間出樣量逐年增加,該方法已經(jīng)不能滿足實驗室需求,我司開發(fā)的NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒一次性解決以上痛點問題。
—對樣本量要求低、微量(1-4mm葉片)
—操作簡單快速(5分鐘釋放基因組DNA)
—室溫處理
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用生物酶,如蛋白酶K
—不使用有毒有害有機試劑
操作流程
案例A 不同生長時間采集水稻葉片擴增2個基因
1、幼苗期 2、插秧期 3、分蘗期 4、拔節(jié)期
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號Nu-GR01)處理幼苗期、插秧期、分蘗期、拔節(jié)期葉片,2×GMO Mix擴增2個不同長度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例B 水稻不同大小葉片擴增2個基因
幼苗期葉片長度1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
成熟期葉片直徑1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號Nu-GR01)處理幼苗期和成熟期葉片,2×GMO Mix擴增2個不同長度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例C 水稻不同部位樣品擴增2個基因
1、葉片 2、莖 3、根 4、花蕊 5、種子
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號Nu-GR01)處理根、莖、葉、花蕊、種子,2×GMO Mix擴增2個不同長度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
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