要想胎牛血清的質(zhì)量不被損壞,學(xué)會(huì)這幾點(diǎn)是必要的
隨著胎牛血清使用越來(lái)越廣泛,胎牛血清組份的復(fù)雜性及作用機(jī)理的關(guān)聯(lián)性,使得人工無(wú)血清培養(yǎng)基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了.但隨著細(xì)胞生物學(xué)及發(fā)酵制藥工業(yè)的發(fā)展,成本及潔凈程度的要求下,勢(shì)必會(huì)有新的人工替代試劑出現(xiàn),而這需要我們科研人員的共同努力.
對(duì)于胎牛血清的功能進(jìn)行詳細(xì)分析:
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物.
2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素 脂類(lèi) 金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力.
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用.
4.是細(xì)胞貼壁 鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源.
如何儲(chǔ)存和解凍胎牛血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
1.將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融.但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻.
2.長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素 纖維蛋白原 玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁.因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融.
3.我們建議胎牛血清應(yīng)保存在-2O℃.若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月.若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍.
胎牛血清保存方法:
(1)長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?
(2)一般廠(chǎng)商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.
(3)血清解凍:瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.